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1.建议提供目的蛋白阳性表达样品（纯蛋白、有阳性表达的细胞或组织、商品化的阳性对照产品等）作为阳性对照

2.免费内参检测为：beta-actin，beta-tubulin，gapdh，histone h3， lamin b1等

3.如需进一步数据分析：totallab quant专0业软件读取iod值、条带的normalization处理、以及发表论0文时所用条带的处理，请另询价

4.对条带结果有特殊要求，请另询价

5.双方签订合同后，收取70%首付后启动预实验

6.wb特殊要求请咨询

1. 为了获得实验zui佳效果,请根据实验调整zui佳工作稀释度;
2. 使用时应按所需的浓度进行稀释,现用现配;

3. 如果一次使用很少可以将其适当分装后使用,这样可以有效的防止试剂污染;

4. 虽然本试剂在有效期过后很长一段时间仍可以使用,但还是---建议您在管体规定的有效期内正确使用;

5. 本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治0疗

博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、---包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有wb、ihc、elisa、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。

抗0体亚型鉴定原理：

抗0体亚型鉴定的原理是利用双抗0体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克0隆抗0体或特异亲和纯化的单克0隆抗0体的类和亚类（可区分出 igg1﹨igg2a﹨igg2b﹨igg3﹨igm﹨iga）。采用小鼠抗0体共有位点的二抗包被微孔板，与加入的培养上清中的小鼠抗0体结合，再加入hrp 标记的抗小鼠各类、亚类的抗0体来分别反应，zui后用 tmb 底物系统显色并用稀---终止，再通过酶0标仪检测吸光度来判断被测单克0隆抗0体的类或亚类。

水佐剂免0疫步骤

步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注：使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg（通常为10~20μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全---和---样颗粒每针次0.1~10μg（通常为1~2μg）。

步骤二：充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

步骤三：通过后腿小腿肌肉注0射免0疫小鼠，每只小鼠100μl。备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注0射。

步骤四：第21天按同样方式加强免0疫一针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行elisa测定，抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内，　随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注：若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求，可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。